
O IgE é um kit imunoenzimático para a determinação quantitativa do IgE baseado no método de sanduiche em microplacas. Durante a primeira etapa de incubação o IgE total da amostra do paciente é capturado por anti-IgE humano impregnado na microplaca. Pelo procedimento de lavagem o soro/plasma excedente é removido dos poços e o IgE permanece vinculado à superfície de fase solida.
A detecção de IgE é ligada na microplaca é realizada com um anti-humano IgE peroxidase de rábano (HRP)- anticorpo marcado formando um complexo anti-IgE/IgE/conjugado. Os poços são lavados novamente, e a solução substrato 3,3’, 5,5’- Tetra-metil-Benzidina(TMB) é adicionada e incubada, resultando no desenvolvimento de uma coloração azul. Após a parada da reação enzimática com ácido sulfúrico (H2SO4) a coloração muda para amarelo.
A densidade óptica(DO) da coloração produzida é medida espectrofotometricamente em 450nm (filtro de referencia 620nm). A concentração de IgE da amostra do paciente é proporcional a DO. Os calibradores com a definição da concentração do IgE (calibrados pela OMS 75/502) são ensaiados simultaneamente com as amostras dos pacientes para gerar uma curva de calibração. Concentrações desconhecidas de IgE nas amostras do teste são calculadas nesta curva.
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Fase (idade) |
n |
Média (UI/mL) |
Média + 1DP (UI/mL) |
1-2 |
29 |
20 |
64 |
3-5 |
31 |
35 |
119 |
6-15 |
45 |
51 |
150 |
16-20 |
59 |
38 |
123 |
21-30 |
114 |
27 |
100 |
31-40 |
38 |
34 |
113 |
>40 |
109 |
34 |
114 |
Total |
425 |
32 |
108 |
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