
Descrição:
Para diagnóstico in vitro. O RIDASCREEN® Cryptosporidium é um ensaio imunoenzimático para a detecção qualitativa de antígenos de Cryptosporidium nas amostras de fezes.
Apresentação:96
Metodologia: ELISA
Grupo: PARASITOLOGIA
Categoria: PARASITAS - PESQUISA DE ANTIGENOS
Registro no MS: 80213250075
A criptosporidiose é uma Infecção por protozoários, que é causada pelo gênero Cryptosporidium. Trata-se de um parasita muito comum nos animais e também é um germe importante também presente nos animais domésticos, principalmente em vitelos. Ao contrário do que se pensava antes, são observadas infecções em humanos em muitos países. O parasita causa muito frequentemente diarréias endêmicas e epidêmicas em crianças de países em desenvolvimento. Em pacientes imunocompetentes, a doença se manifesta como uma gastroenterite autolimitada. A diarréia dura de 3 a 10 dias e pode ser acompanhada de febre e sintomas gastrointestinais, como vômitos e dores, que são similares aos do Giardiasis (Lambliasis).
Mais graves são os sintomas e consequências em pacientes imunoincompetentes, nos quais as diarréias são muito graves e persistentes. Igualmente à cólera, a infecção leva uma desidratação muito forte e que representa um risco à vida. Foram relatados casos nos quais uma perda de líquidos de 3 a 12 litros por dia foi verificada. A transmissão da infecção pode ser feita do animal para o humano através de água contaminada e também de humano para humano. Os membros de uma família, crianças nos jardins de infância, bem como os grupos de risco dos homossexuais e portadores de HIV estão especialmente expostos ao risco. O método mais usado no passado para diagnosticar o cryptosporidiosis foi a comprovação microscópica de oocistos nas fezes ou o exame microscópico das amostras biópsicas do intestino delgado, sendo necessário pessoal experiente para ambos.
Um método alternativo importante para o exame de amostra de fezes é o ELISA do antígeno de Criptosporidium aqui descrito, que, na sua sensibilidade, iguala-se ao exame microscópico, não necessita de pessoal especializado em parasitologia, é fácil e rápido de executar e não depende dos organismos intactos nas amostras de fezes.
Referência:
As amostras cujo valor de absorbância estiverem 10% acima do cut-off calculado são consideradas positivas.
As amostras cujo valor de absorbância estiverem em uma faixa entre ± 10% do cut-off são consideradas indeterminadas
As amostras cujo valor de absorbância estiverem 10% abaixo do cut-off calculado
devem ser consideradas negativas.
Procedimentos:
Preparo do tampão de lavagem:
Misturar uma parte do tampão de lavagem concentrado (Wash) com 9 partes de água destilada.
Preparo das amostras:
Adicionar em um recipiente 1 mL de tampão de diluição de amostra (Diluent 1). As fezes líquidas são absorvidas em uma pipeta (aprox. 100 μl) e suspensas no tampão.
No caso de fezes sólidas, uma quantidade equivalente de fezes (aprox. 50 - 100 mg) é retirada com uma espátula ou uma alça e suspensa na solução
Pipetar 100μl do controle positivo, do tampão de diluição das amostras (= controle negativo) ou da suspensão das amostras de fezes.
Pipetar 100 μl conjugado.
Incubar por 60 minutos à temperatura ambiente (20 – 25 °C).
Lavar 5 vezes, cada vez com 300 μl de tampão de lavagem.
Pipetar 2 gotas 100 μl de substrato em todas as cavidades.
Incubar por 15 minutos à temperatura ambiente (20 –25 °C) no escuro.
Bloquear a reação com a adição de 50 μL de reagente bloqueador.
Ler a absorbância a 450 nm (opcional: comprimento da onda de referência - 600 nm).
País: ALEMANHA