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CAMPYLOBACTER - R-BIOPHARM



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Descrição:
Para diagnóstico in vitro. O RIDASCREEN® Campylobacter é um ensaio imunoenzimático para a detecção qualitativa de antígenos de C. jejuni e C.coli nas amostras de fezes.

Vantagens:
Método ELISA
Reagentes Pronto para uso
Fácil procedimento técnico

Apresentação:96

Metodologia: ELISA

Grupo: PARASITOLOGIA

Categoria: PARASITAS - PESQUISA DE ANTIGENOS

Registro no MS: 80213250143

A campilobacteriose representa atualmente no mundo, juntamente com a salmonela, uma das doenças diarréicas relacionadas aos alimentos mais comuns nas pessoas. A grande freqüência da enterite por campilobacter é favorecida pela grande presença abrangente da espécie da bactéria entre os animais domésticos, selvagens e de trabalho (pássaros e mamíferos).

Como comensais no trato intestinal dos pássaros, as bactérias são transportadas à cadeia alimentar dos humanos principalmente através destes animais. Mas também outros alimentos como leite, carne moída e água potável são veículos para a transmissão do agente patogênico.

O campilobacter é transportado pelos parasitas em grandes quantidades ao meio-ambiente e alcança as pessoas através de alimentos contaminados. Mas também o contato direto com os próprios animais doentes de campilobacteriose, bem como o contato via oral ou fecal, principalmente em crianças, são possíveis meios de transmissão da enterite por campilobacter.

A dose de infecção com 500 germens é relativamente baixa. Das 15 espécies conhecidas de campilobacter, o C. jejuni e C. coli são os principais causadores da gastrenterite nos humanos. Após um tempo de incubação de 2 a 10 dias, os doentes não tratados expelem os agente patogênico por 4 semanas nas fezes. No caso de imunodeficiência, pode ocorrer uma segregação permanente. Enquanto muitas infecções ocorrem assintomaticamente, nos doentes observa-se uma fase prodômica com febre, dores de cabeça, mialgias, e cansaço, os típicos sintomas da enterite com diarréia, cãibras e dores abdominais.

As diarréias são de pastosas a massivas, agudas e, ocasionalmente, com expelição de sangue. Artrites e a rara síndrome de Guillain-Barré são as conseqüências futuras da doença. A terapia é geralmente sintomática através de substituição de eletrólito e de líquidos e, somente em casos mais difíceis, com antibióticos.

O isolamento bem sucedido do agente patogênico sensível das amostras de fezes possivelmente frescas possibilita um transporte curto ou refrigerado. Independentes disto são os processos modernos de detecção de antígeno, como o presente RIDASCREEN® Campylobacter ELISA, que também detecta os antígenos específicos campilobacter nas amostras de fezes, quando os agentes patogênicos não são mais isoláveis.

 

Referência:

As amostras cujo valor de absorbância ficam acima de 10% valor cut-off calculado são consideradas positivas.
As amostras cujo valor de absorbância ficam na área de +/-10% do valor cut-off são consideradas indeterminadas e devem ser repetidas.

As amostras cujo valor de absorbância ficam abaixo de 10% abaixo do valor de cut-off calculado devem ser consideradas negativas.

Procedimentos:
Preparo do tampão de lavagem:
Misturar uma parte do tampão de lavagem (Wash) com 9 partes de água destilada.
Preparo das amostras:
Adicionar em um tubo de amostra marcado, 1 ml de tampão de diluição de amostra (Diluent 1). No caso de fezes liquidas, adicionar aprox. 100 μl da suspensão.
No caso de fezes sólidas, uma quantidade equivalente de fezes (aprox. 50 - 100mg) e retirada com uma espátula e suspensa. A homogeneização da suspensão de fezes é feita através da absorção e retirada com a pipeta descartável ou alternativamente através da mistura em um mixer vortex. Após um curto período de repouso para a sedimentação de partículas maiores de
fezes, pode ser utilizado, deste modo, o sobrenadante clareado diretamente no teste.
Adicionar 2 gotas, ou 100 μl do controle positivo (Control +) do tampão de diluição das
amostras (Diluent 1) (= controle negativo) ou da suspensão das amostras de fezes são gotejados nas cavidades.
Incubar a temperatura ambiente (20 –25 °C), por 60 minutos.
Lavar 5 vezes, cada vez com 300 μl de tampão de lavagem.
Adicionar 2 gotas, ou 100 μl do conjugado de enzima (Conjugate) nas cavidades e incubar a temperatura ambiente (20 – 25 °C) por 30 minutos.
Lavar 5 vezes.
Adicionar de 2 gotas, ou 100 μl de substrato (Substrate) em todas as cavidades.
Incubar por 15 minutos a temperatura ambiente (20 – 25°C) no escuro.
Adicionar 1 gota, ou 50 μl de reagente bloqueador (Stop) em todas as cavidades.
Homogeneizar e medir a absorbância em 450 nm

País: ALEMANHA