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IFA EBV (VCA) IgG VIRO IMMUN



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Descrição:
Ensaio de imunofluorescência para detecção de anticorpos contra vírus Epstein-barr em soro ou plasma humano.

Vantagens:
Sensibilidade: 96,5%

Apresentação:50 ,100

Metodologia: IMUNOFLUORESCENCIA INDIRETA

Grupo: IMUNOLOGIA

Categoria: DOENCAS INFECCIOSAS

Registro no MS: 80213250274

O vírus Epstein-barr (EBV) é um vírus da família Gammaherpesvirinae, encontrado no mundo todo. O contato com EBV ocorre em todas as idades, dependendo do padrão socioeconômico. Nos países em desenvolvimento a taxa endêmica é em torno de 100% aos 3 anos de idade, enquanto nos países desenvolvidos a primeira infecção ocorre em crianças após 3 anos e pré adolescentes ou posteriormente ocorre entre 14 e 20 anos de idade. A taxa endêmica na população adulta é de 90%.

O EBV é transmitido pela saliva, mas também pode ser transmitido por transfusão sanguínea e transplante. Na infância a infecção é geralmente assintomática, mas nos adultos em 30-60% dos casos se manifesta como mononucleose (também chamada febre glandular), uma infecção aguda do sistema linfático. Os sintomas típicos são febre, inchaço dos linfonodos, assim como mudança característica no quadro sanguíneo, por exemplo aumento dos linfócitos, monócitos e células plasmáticas. Adiante, EBV é associado com linfoma de Burkitt, um câncer comumente encontrado em crianças na África central e carcinoma naso-faríngeo que ocorre no Sudeste da Ásia.

Após infecção por EBV, quer sintomática ou assintomática, resta a persistência do vírus ao longo da vida nos linfócitos B infectados e sua distribuição a partir da faringe. Durante o curso da infecção por EBV uma variedade de antígenos (VCA, EA e EBNA) são produzidos em diferentes tempos pelas células infectadas. A ocorrência característica de anticorpos específicos a estes antígenos confere um diagnóstico diferencial para infecção por EBV. O antígeno aparente, consiste em uma estrutura protéica do capsídeo viral e é produzido na fase lítica, seguindo o inicio da replicação do DNA.

Referência:

EBV VCA IgG - NEGATIVO:

Sem fluorescência, ou fluorescência muito fraca nas células infectadas.

Anticorpos IgG não detectáveis para EBV VCA.

EBV VCA IgG - POSITIVO:

Fluorescência verde maçã das células infectadas.

Anticorpos IgG detectáveis para EBV VCA. 

3+ a 4+ = fluorescência máxima,brilhante de cor verde-maçã

2+ = fluorescência verde-maçã de menor intensidade

1+ = fluorescência verde maçã fraca

duvidoso – (+) = fluorescência verde maçã muito fraca.

Procedimentos:
Pipetar 1 gota de cada controle e 20 – 50 μl de cada amostra diluída em
seu respectivo poço (cobrindo-o totalmente ).
Coloque as lâminas um uma camara úmida para
evitar evaporação.
Para a detecção de anticorpos IgG - Incubar por 60 minutos em temperatura ambiente.
Após a incubação, lavar as lâminas cuidadosamente com uma pisseta. Lavar em três tempos de 5 minutos.
Após o procedimento de lavagem, retire o excesso de tampão e use um papel filtro para retirar o excesso, sem tocar no poço.
Devolver imediatamente na câmara úmida.
Adicionar 1 gota de Conjugado em cada poço e incubar a 30 minutos em temperatura ambiente no escuro.
Lavar a lâmina conforme descrito acima.
Adicionar 10 gotas de Azul de Evans em 100mL de tampão e corar as lâminas por 5 minutos exatos.
Retire a lâmina da incubação e realize a lavagem conforme descrito na primeira etapa de lavagem.
Em seguida, adicione 2-3 gotas de Meio de Montagem ao longo da lâmina e em seguida, adicione a lamínula. Evitar a formação de bolhas de ar.
Ler as lâminas dentro de 30 minutos em 400-800x, usando um microscópio de fluorescência.

País: ALEMANHA