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M2PK FEZES -SCHEBO



Produtos



Descrição:
Avaliar quantitativamente tumor M2-PK nas fezes.

Vantagens:
- Teste Não Invasivo.
- Não requer dieta especial.
- Não sofre interferência de alimentos específicos.

Apresentação:96

Metodologia: ELISA

Grupo: MARCADORES

Categoria: TUMORAIS

Registro no MS: 80213250366

A maioria dos tumores humanos expressam a isoforma M2 da glicoenzima piruvato kinase. Esta enzima é liberada pelas células tumorais em quantidade detectável pelos fluidos corporais. A concentração do M2 tumoral é de acordo com a malignidade do tumor. Esta nova atividade metabólica do tumor é chamada Tumor M2-Pk e é uma chave reguladora do metabolismo tumoral.

Procedimentos:
- Dilua a solução de extração (5x): 100 mL solução de extração (5x) + 400mL de água destilada;
- Pesagem da amostra de fezes: 100 mg fezes + 10 mL solução ou 75 mg fezes + 7,5 mL solução de extração.
- Suspender a amostra de fezes em temperatura ambiente. Após 15 minutos de tempo de extração, re-suspender novamente. Deixe a extração por 10 minutos em temperatura ambiente. Então remova o sobrenadante para o uso.
- Diluição da extração de fezes: 200 µL de solução de extração de fezes + 200 µL de amostra/ solução de lavagem 1X.
- preparo da diluição do conjugado de biotina diluído 1:100.
Para 2 tiras (1/6 placas):
15 µL anti marcador M2-PK bio + 1,5 mL amostra/ solução de lavagem
Para 4 tiras (1/3 placas):
25 µL anti marcador M2-PK bio + 2,5 mL amostra/ solução de lavagem
Para 6 tiras (1/2 placas):
30 µL anti marcador M2-PK bio + 3,0 mL amostra/ solução de lavagem
Para 12 tiras (1 placa):
60 µL anti marcador M2-PK bio +6,0 mL amostra/ solução de lavagem.
- Branco: poços A1 e A2 = pipete 50 μl de solução de lavagem em cada poço.
- Padrões = pronto para uso passe pelo vortex e pipete 50 μl em duplicata.
- Controle = pronto para uso passe pelo vortex e pipete 50 μl por poço.
- Amostras fezes = pipete 50 µl da amostra em cada poço em duplicata.
- Lavar 3 vezes com 250 μl de solução de lavagem.
- Adicione 50 µl do conjugado diluído 1:100. Incube por 30 minutos a temperatura ambiente. Repita a etapa de lavagem descrita acima.
- Incube por 30 minutos em temperatura ambiente.
- Lavar 3 vezes com 250 μl de solução de lavagem.
- 100 μl de solução de substrato.
- Incube por 15 minutos em temperatura ambiente, no escuro.
- 100 μl de solução Stop.
- Leia a densidade óptica a 450 nm.