Voltar

ROTAVÍRUS - R-BIOPHARM



Produtos

Hotsite R-Biopharm


Descrição:
Para diagnóstico in vitro. O RIDASCREEN® Rotavírus é um ensaio imunoenzimático para a detecção qualitativa de rotavírus nas amostras de fezes.

Apresentação:96

Metodologia: ELISA

Grupo: PARASITOLOGIA

Categoria: VIRUS - PESQUISA DE ANTIGENOS

Registro no MS: 80213250068

Os rotavírus são os agentes patogênicos mais importantes de uma gastroenterite não bacteriana nas crianças de 6 meses a 3 anos. Eles, porém, também são detectados em crianças mais velhas e em adultos como causadores de doenças.

Em grupo de risco, ou seja, em crianças ou em pacientes idosos ou imunossuprimidos, eles podem levar à morte. As infecções com rotavírus ocorrem com frequência nos meses de inverno. As endemias e as epidemias com alguns milhares de doentes também foram descritas.

As crianças hospitalizadas com enterites agudas, até 50 % das amostras examinadas são rotavírus positivas. Os rotavírus transmitidos por via oral e anal são expelidos em grandes quantidades no intestino, de modo que as infecções nosocomiais causados por rotavírus são muito temidas nos recém-nascidos e nas crianças pequenas e o seu tratamento é difícil.

Portanto, uma detecção prévia e segura para o reconhecimento do rotavírus e para evitar outras infecções também é muito importante. A detecção de rotavírus foi primeiramente possível com o exame microscópico eletrônico de amostras de fezes e material de biópsia do intestino - este método é usado hoje como método de referência.

As detecções desenvolvidas in-vitro nas culturas celulares são difíceis e longas; por isso não são utilizadas frequentemente para a detecção de rotavírus. Os exames sorológicos só podem contribuir para a certeza diagnóstica de uma enterite com rotavírus, visto que o anticorpo IgM só pode ser detectado 5 dias após o início da doença. Um diagnóstico rápido, portanto, não é possível.

O teste RIDASCREEN® Rotavirus é como um enzima-imuno-ensaio um método fácil e altamente sensível que possibilita uma detecção rápida e segura do antígeno de rotavírus. Grandes quantidades de amostras também podem ser trabalhadas em pouco tempo.

Referência:

As amostras cujo valor de absorbância ficam mais de 10% acima do cut off calculado são consideradas positivas.

As amostras cujo valor de absorbância ficam na área de 10% acima e abaixo do valor cut off são consideradas indeterminadas e devem ser repetidas.

As amostras que ficam mais de 10% abaixo do cut off calculado devem ser consideradas negativas.

Procedimentos:
Preparo do tampão de lavagem:
Misturar uma parte do concentrado do tampão de lavagem com 9 partes de água destilada.
Preparo das amostras:
Misturar 1 ml de tampão de diluição de amostra.
Para fezes líquidas são pipetadas 100 μl suspensas no tampão colocado antes.
Para fezes sólidas, uma quantidade equivalente de fezes (aprox. 50 - 100 mg) é retirada com uma espátula ou uma agulha metálica e suspensa.
Homogeneizar a suspensão de fezes
Após um curto período de repouso para a sedimentação de partículas maiores de fezes, pode ser utilizado, deste modo, o sobrenadante clareado diretamente no teste.
Pipetar 100μl do controle positivo, e da suspensão das amostras de fezes.
Pipetar 100 μl do anticorpo conjugado à biotina (conjugado 1).
Incubar por 60 minutos à temperatura ambiente (20 – 25 °C).
Lavar 5 vezes, cada vez com 300 μl de tampão de lavagem.
Pipetar 100 μl do conjugado poliestreptavidina-peroxidase (Conjugado 2).
Incubar por 30 minutos à temperatura ambiente (20 – 25 °C).
Lavar 5 vezes.
Pipetar 100 μl de substrato em todas as cavidades.
Incubar a placa por 15 minutos a temperatura ambiente (20 –25 °C) no escuro.
Bloquear a reação com a adição de 50 μl de reagente bloqueador em todas as cavidades.
Medir a absorbância a 450nm (comprimento da onda de referência 600 nm).

País: ALEMANHA