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NOROVÍRUS - R-BIOPHARM



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Descrição:
Para diagnóstico in vitro. O RIDASCREEN® Norovírus é um enzima imunoensaio para a detecção qualitativa de norovírus do genogrupo I e II nas amostras de fezes.

Vantagens:
• Tempo - Resultado em menos de 2 horas.
• Diagnóstico - Redução no tempo de internação
• Financeiro - o correto diagnóstico reduz gastos com internação e uso de medicamentos inadequado
• Saúde - desenvolvimento de medicamentos e vacinas.

Apresentação:96

Metodologia: ELISA

Grupo: PARASITOLOGIA

Categoria: VIRUS - PESQUISA DE ANTIGENOS

Registro no MS: 80213250084

O nome Norovírus significa um grupo de vírus patogênicos aos humanos que, devido à sua morfologia, foi primeiramente diferenciado dos calicivírus clássicos como um pequenos vírus de estrutura redonda (SRSVs: small round structured viruses - vírus pequenos de estrutura redonda).

Estes últimos receberam o seu nome devido à sua estrutura de superfície homogênea típica em forma de uma série sucessiva de cálices (lat. calix = cálice). Atualmente os norovírus e os calcivírus clássicos são considerados da mesma família Caliciviridae. Todos estes vírus SRS foram designados de acordo com os seus respectivos locais de isolamento.

De modo que o nome Norwalk-like originou-se dos vírus isolados em ataques de gastroenterite e o seu primeiro isolamento como vírus SRSV ocorreu na cidade de Norwalk, no estado de Ohio no ano de 1972. O vírus Norwalk foi então o protótipo dos atuais norovírus. Analogamente, foram designados mais tarde outros isolados como Snow Mountain agent, Hawaii agent, Montgomery county agent, etc.

De acordo com uma atual determinação do “International  Committee on Taxonomy of viruses (ICTV)” (comité internacional para a toxonomia dos vírus) no ano de 2002, atualmente diferencia-se entre os calcivírus ambos os gêneros humanos Norovirus e Sapovirus. Além disso, há dois gêneros patogênicos aos animais.

Ainda não há uma resposta para até que ponto os calcivírus podem ser transmitidos dos animais para os humanos. No caso de todos estes vírus, trata-se de vírus RNA de filas individuais icosaédricos, cujos capsideos são formados de cópias múltiplas de uma única proteína de estrutura e que não são cultiváveis.

Eles causam tanto infecções individuais como também ataques de gastroenterite, dos quais todos os grupos etários podem ser vítimas. Ao mesmo tempo, o gênero Norovírus causa claramente a maioria dos casos de todas as ocorrências de gastroenterite não bacteriais. Devido à grande variabilidade genética, divide-se o gênero norovírus em dois genogrupos (I e II), que, por sua vez, diferenciam-se em 7 (GGI) ou 8 (GGII) genótipos.

Uma gastroenterite causada por norovírus tem como sintomas um forte enjoo, vômito extremo e forte diarréia. O tempo de incubação fica entre 6 e 48 horas, sendo que os sintomas podem durar de 12 a 60 horas depois da incubação. A dose de infecção é com apenas 100 partículas de vírus bastante baixa, de modo que a transmissão de uma pessoa a outra é muito efetiva.

Visto que o vírus é expelido tanto pelo vômito como pelas fezes, além da transmissão fecal-oral, uma transmissão aerógena através da formação de aerosóis virais também é significativa. Isto demonstra-se através da propagação frequente e muito rápida em instalações comunitárias. Com exceção de poucos casos, o expelimento do vírus dura aprox. 2 semanas e aumenta adicionalmente o perigo de propagação.

As reinfecções são possíveis, visto que a acentuada variabilidade dos norovírus não permitem uma imunidade completa. A maioria dos diagnósticos feitos com base nas amostras de fezes, além da microscopia eletrônica, principalmente através da detecção molecular de genoma por PCR, são limitados.

Já que estes métodos são relativamente complicados e necessitam de especialização e equipamentos laboratoriais específicos, um teste de seleção mais fácil e mais rápido vem sido desejado há muito tempo. Com o presente ELISA esta necessidade é preenchida em grande parte. O ELISA RIDASCREEN® Norovirus possibilita a detecção altamente sensível de norovírus de ambos os genogrupos.

Referência:

As amostras cujo valor de absorbância ficam mais de 10% acima do calor cut-off calculado são consideradas positivas.

As amostras cujo valor de absorbância ficam na área de 10% acima e abaixo do valor cut-off são consideradas indeterminadas e devem ser repetidas.

As amostras que ficam mais de 10% abaixo do valor cut-off calculado devem ser consideradas negativas.

Procedimentos:
Preparo do tampão de lavagem:
Misturar um parte do tampão de lavagem concentrado com 9 partes de água destilada. (Ex.: 100 ml do concentrado com 900 ml de água destilada).
Preparo das amostras:
Colocar em um tubo 1 ml de tampão de diluição de amostra.
No caso de fezes líquidas, adicionar 100μl e suspender no tampão colocado antes.
No caso de fezes sólidas, adicionar aprox. 50 - 100mg.
Homogeneizar e aguardar cerca de 10 minutos para que as partículas maiores sedimentem e o sobrenadante possa ser utilizado.
Pipetar 100 μl de controle positivo, do tampão de diluição das amostras (= controle negativo) e pipetar 100μL da suspensão das amostras de fezes nas cavidades.
Pipetar 100 μl do anticorpo conjugado com biotina.
Incubar por 60 minutos a temperatura ambiente (20 - 25 °C).
Lavar 5 vezes, cada vez com 300 μl de tampão de lavagem.
Pipetar 100 μl do conjugado streptavidinaperoxidase
Incubar em temperatura ambiente (20 – 25 °C) por 30 minutos.
Lavar 5 vezes.
Pipetar 100 μl gotas de substrato Substrate
Incubar 15 minutos a temperatura ambiente (20 – 25 °C) no escuro.
Bloquear a reação adicionando de 50μl de reagente bloqueador em todas as cavidades.
Ler a absorbância a 450 nm.

País: ALEMANHA